生物缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时保持溶液的pH值相对稳定的溶液，多数细胞仅能在很窄的pH范围内进行活动，需要有缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化。生化研究中，常常要用到缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度。 

生物缓冲液的特点: 

磷酸盐缓冲液:

磷酸盐缓冲液是应用最广泛的缓冲液。由于其二次离解作用，缓冲液pH值范围较宽，可配置不同pH值的酸性、碱性和中性缓冲液: 

制备酸性缓冲液可直接使用NaH₂PO₄或KH₂PO₄, pH值范围为1~5; 

碱性缓冲液可直接使用Na₂HPO₄或K₂HPO₄, pH范围为9~12; 

中性缓冲液中含有等量的NaH₂PO₄和Na₂HPO₄或等量的KH₂PO₄和K₂HPO₄溶液，pH值为5.5~8.5。 

优点：①易于配制成各种浓度 ；②pH值范围宽；③pH受温度的影响小；

缺点：①易与常见的钙、镁、重金属离子形成沉淀；②抑制某些生化过程；

Tris缓冲液: 

Tris缓冲液在生物化学研究中有着广泛的应用。它是弱碱，通常在“中性”范围内使用。Tris-HCl缓冲:pH = 7.5 ~ 8.5;三磷酸缓冲液:pH = 5.0 ~ 9.0。 

除TRIS - hcl外，TRIS还有多种衍生化缓冲. 

TBS=Tris-HCl+ NaCl+KCl，常用来清洗免疫染色组织或Western blotting中的Western blotting膜; 

TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20，一种常用于Western Blotting的膜缓冲液;

TE=Tris-HCl+EDTA，对DNA碱基具有保护作用，常用于DNA的稳定和储存; 

TAE=Tris碱+乙酸+EDTA，是一种广泛应用于短片段DNA电泳的缓冲体系;

TBE=三碱基+硼酸+EDTA，适用于长期DNA电泳，对小片段有较好的分离效果。 

优点： ①因为Tris碱的碱性较强，所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液；②对生物化学过程干扰很小，不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。 

缺点：①缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大，缓冲液稀释十倍，pH值的变化大于0.1；②温度效应大，温度变化对缓冲液pH值的影响很大，所以一定要在使用温度下进行配制，室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃～4℃。 ③易吸收空气中的CO2，所以配制的缓冲液要盖严密封。④此缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用，所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。

 Good’s缓冲液:

1.pKa 在6~8 之间；2.在水溶液中有高溶解度；3.盐效应很小；4.不易被运送通过细胞膜；5.不易受温度、离子组成、浓度等因素影响解离度；6.不会与金属离子形成错合物，或错合物不沉淀、不干扰生物活性；7.化学性质稳定。

Good’s缓冲液的主要优点是不参加和不干扰生物化学反应过程，对酶化学反应等无抑制作用，所以它们专门用于细胞器和极易变性的、对pH敏感的蛋白质和酶的研究工作。 

其缺点是：①价格昂贵，②对测定蛋白质含量的双缩脲法和Lowry法不适用，因为它们会使空白管的颜色加深。 

甘氨酸缓冲液: 

甘氨酸缓冲液pH值范围广，应用范围广。pH值范围为2.0~11.0。

优点：为细胞成分和各种提取物提供更亲近的自然环境。

缺点：类似于磷酸盐缓冲体系;干扰某些生化反应过程，例如代谢过程。