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核酸纯化试剂的使用方法和注意事项

2020-08-11

核酸纯化试剂使用方法及注意事项,供参考:

1.使用无水乙醇与纯化水配制70%乙醇备用。

2.从2-8℃冰箱中取出磁珠悬浮液,在室温条件下震荡混匀,平衡30min。

3.将充分震荡混匀平衡后的磁珠加入待纯化酶反应或PCR反应产物溶液中。若待纯化产物体积不足,可用纯化水或10mM Tris-盐酸(pH8.0)补充至相应体积。

4.用移液器反复吹打10次,将磁珠悬浮液和PCR产物或者酶反应物充分混匀,室温条件下静置5min。

5.将反应板放置在磁力架上,静置2min,待溶液澄清后将上清吸走,转入废液桶内。

6.向反应板中加入200μL新鲜配置的70%的乙醇,室温静置30s。静置结束后将乙醇吸走,转入废液桶内。操作环节不可将反应板从磁力分离架上拿下或将磁珠吹散。

7.重复步骤六。

8.保持反应板置于磁力架上状态,室温开盖晾干2min以去除残存的乙醇。

9.将反应板从磁力架上取下来,加入50μL洗脱液,移液器反复吹打10次混匀,室温静置3min。洗脱液加入量根据实际需要而定,但应不少于5μL。

10.将反应板重新放置在磁力架上,室温静置1min,上清液即纯化后的DNA产物。

11.将上清液转入新的反应管或者反应板中,供下一步反应或检测使用。