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细胞培养化学性污染的来源、危害及预防

2021-08-27

硼酸盐缓冲液常用的有效pH范围是:pH=8.5~10.0,因而它是碱性范围内最常用的缓冲液,其优点是配制方便,只使用一种试剂,缺点是能与很多代谢产物形成络合物,尤其是能与糖类的羟基反应生成稳定的复合物而使缓冲液受到干扰。甘氨酸缓冲液常用的pH范围为9.5~10.1,甘氨酸本身是代谢产物,有可能会干扰部分生物反应,另外,两者都不具有UV 吸收能力,且不与二价正离子作用。

Good’s缓冲液:

Good’s一般的缓冲液系统并不适合生化实验所使用,必须用人为设计和人工合成的方法来找到专门用于生命科学研究的特定的缓冲体系,这些缓冲体系们都具有以下特质:

1.pKa 在6~8 之间;

2.在水溶液中有高溶解度;

3.盐效应很小;

4.不易被运送通过细胞膜;

5.不易受温度、离子组成、浓度等因素影响解离度;

6.不会与金属离子形成错合物,或错合物不沉淀、不干扰生物活性;

7.化学性质稳定。

Good’s缓冲液的主要优点是不参加和不干扰生物化学反应过程,对酶化学反应等无抑制作用,所以它们专门用于细胞器和极易变性的、对pH敏感的蛋白质和酶的研究工作。

其缺点是:①价格昂贵,②对测定蛋白质含量的双缩脲法和Lowry法不适用,因为它们会使空白管的颜色加深。