首先向牛血清中加入生理盐水或PBS溶液将牛血清稀释；再向稀释后的牛血清中加入适量硫酸铵，2~8℃静置30min以上，离心收集上清液。

第二步，向上清液中加入2~3倍体积的PBS溶液，混匀后进行疏水层析，使用PBS溶液洗脱，收集洗脱液。

第三步，将洗脱液进行分子筛层析，收集不含盐和其它小分子的蛋白峰；所述层析填料为G10-G75葡聚糖。

第四步，使用阴离子交换层析进一步纯化牛血清白蛋白，通过0.1~1.5M浓度氯化钠进行梯度洗脱，收集精纯的牛血清白蛋白。

最后，经过对病原微生物进行灭活、分子筛层析、超滤浓缩、过滤除菌得到纯度高于99.5%的牛血清白蛋白。