常用的方法是使用溶液法进行蛋白质提取(例如RIPA裂解物),但是在蛋白质提取中通常会产生两种不同的成分,即RIPA可溶性和RIPA不溶性成分。通常,RIPA不溶成分会被我们直接丢弃并忽略。但是有文章证实,丢弃的RIPA不溶成分中存在许多蛋白质。换句话说,通过溶液法提取的总蛋白质不是完整的蛋白质,而只是一些可溶性蛋白质。
蛋白质的溶液提取将人工激活caspase-3和caspase-7;它还会人为地激活某些激酶活性;影响磷酸化研究;影响细胞外基质;影响定量,定性蛋白质研究。目前,通过离心柱法提取蛋白质可以解决上述问题。只需通过柱子添加裂解物和离心机,而不会产生不溶成分,就可以提取出完整的总蛋白。